细胞培养中的生物污染类型及其特点与防控措施

细胞培养中的生物污染类型及其特点与防控措施

在细胞培养过程中，生物污染是一个不容忽视的问题。常见的生物污染类型包括细菌污染、支原体污染、原虫污染、黑胶虫污染（存在争议）、真菌污染、病毒污染以及非同种细胞污染。这些污染类型各具特点，对细胞生长和实验结果产生不同程度的影响。以下是对这些污染类型的详细阐述及相应的防控措施。

1. 细菌污染

• 特点：细菌污染常见，如大肠杆菌、葡萄球菌等。污染后培养液易变黄，显微镜下可见黑色细沙状颗粒，细胞停止生长并出现中毒表现。

• 防控措施：在培养液中加入相应的抗生素，以预防绝大多数的细菌污染。

2. 真菌污染

• 特点：真菌污染在梅雨季节尤为常见，污染细胞的多为烟曲霉、黑曲霉等。污染后培养液中形成白色或浅黄色漂浮物，镜下可见纵横交错的菌丝。细胞生长变慢，最终因营养耗尽及毒性作用而脱落死亡。

• 防控措施：保持培养环境的干燥和清洁，使用经过严格灭菌的培养器材和溶液。一旦发现真菌污染，应立即丢弃受污染的细胞和培养液。

3. 支原体污染

• 特点：支原体大小介于细菌和病毒之间，对热敏感，对一般抗生素不敏感。污染后培养液轻微混浊，细胞变化不显著，但会逐渐死亡。

• 防控措施：使用经过支原体阴性检测的血清，加入高浓度抗生素进行预防或治疗。也可采用加温除菌法，但需先进行预实验确定最佳处理时间。

4. 黑胶虫污染（存在争议）

• 特点：低倍镜下为黑色点状，高倍镜下可见黑色小虫游动。对细胞生长状态无明显影响，增殖旺盛后会自然消失。

• 防控措施：更换血清，一般无需特殊处理。

5. 原虫污染

• 特点：培养液轻微混浊，显微镜下可见大量细小点状物活动。细胞生长速度减慢，状态不佳。原虫与细胞可共生，但会争夺营养。

• 防控措施：严格筛选和纯化细胞株，避免使用受污染的培养液和器材。

6. 病毒污染

• 特点：病毒污染可能来自原代细胞培养中的潜在病毒。污染后细胞生长不受影响，但生产疫苗等生物制品不安全。

• 防控措施：对原代细胞进行严格的病毒检测，确保无病毒污染。使用经过认证的病毒阴性血清和培养液。

7. 非同种细胞污染

• 特点：即细胞交叉污染，由于操作不当导致。污染后细胞生长受影响，实验结果无效。

• 防控措施：严格分开各细胞株所需的器材和溶液，确保操作规范。定期对培养环境进行清洁和消毒。

总结

污染是细胞培养的大敌，预防和避免污染是成功培养细胞的关键。在实验过程中，应始终保持危机意识，严格遵守操作规程，确保培养环境的清洁和无菌。一旦发现污染，应立即采取措施进行处理，以避免浪费时间和资源，确保实验结果的准确性和可靠性。