1、取材及固定：组织样本：样品尺寸要求 1~2 mm3 左右，加入 2.5%戊二醛，于 4 度保存。对于某些特定形态的组织样品（如肠道等），取材时至少保证组织块一个面的厚度为 1 mm，对有切片方向要求的组织样品，还需标识切片横纵轴方向。细胞/细菌样本：细胞团要求至少半个绿豆大小。悬浮培养细胞/细菌，离心收集，弃去培养液，加入 2.5%戊二醛，用牙签拨散细胞团，于 4 度保存。对于贴壁细胞，先倒去培养液，加入 2.5%戊二醛，4 度固定 15 分钟，用细胞刮刮下，离心收集（固定液保留），于 4 度保存。固定时间：至少 4 个小时。

2、饿酸固定将用戊二醛固定的细胞或组织，经 0.1 M 磷酸缓冲液（PH7.2）漂洗 3 次，每次 15 分钟，再用 1%的饿酸•0.1 M 磷酸缓冲液（PH7.2）室温（20 ℃）固定 2 小时（固定时间因样品不同而适当调整）。然后再经 0.1 M 磷酸缓冲液(PH7.2) 漂洗 3 次，每次 15 分钟。

3、脱水样品脱水经 30%、50%、70%、80%、85%、90%、95%、100%（两次）酒精梯度脱水，每次 15~20 min（含水量多、细胞膜厚的样品可适当延长脱水时间）。

4、渗透渗透剂依次为丙酮：环氧树脂（2：1）、丙酮：环氧树脂（1：1）、环氧树脂，37 度温箱内，每次渗透 8~12 h。

5、包埋将渗透好的样品放入胶囊或包埋板中，加入包埋剂环氧树脂，在 60 度温箱中聚合 48 h。

6、超薄切片切片厚度：80~100 nm。

7、双染色铀铅双染色（2%醋酸铀饱和水溶液，枸橼酸铅，室温染色 15 min），切片室温干燥过夜，电镜观察。

电镜型号：TEM Hitachi HT7700 产地 Japan