产品简介： 正常精液是一种混合物，在射精时由睾丸和附睾的分泌物及悬浮其中的精子 与前列腺、精囊腺和尿道球腺的分泌物混合而成，最终射出的混合物是一种粘稠 的液体。精子分析的方法有很多，其中可通过培养进行检测。 精子细胞 BWW 培养基又称为获能培养液（capacitatingmedium），主要由 系列盐离子、酚红、葡萄糖、丙酮酸钠、BSA 等以及抗生素组成，每 1000ml BWW 培养基中含 100，000U 青霉素钠盐和 100mg 链霉素，是一种旨在用于 广谱动物和人体精子细胞获能处理的常用营养液。其标准化成分配方依据 Biggers-Whitten-Whittingham(BWW)研究小组在 1971 年发表的成果，适合于各 种动物和人体精子细胞处理，该试剂经无菌处理。

自备材料： 1、 无菌离心管 2、 离心机 3、 细胞培养箱

操作步骤(仅供参考)： 1、取干净的精液样本室温放置 30-60min，使之充分液化。 2、制备精子细胞(仅供参考，不是必须步骤)： 1)、上泳法：取一个无菌的 15ml 锥底离心管，加入 1ml 液化的精液，在其上方 轻轻加入 Earle 培养液 1.2ml，45°倾斜试管，37℃孵育 1h。轻轻竖立试管， 取出最上层的 1ml 液体。加入 8ml 增补的 Earle 培养液稀释，500g 离心 5min， 弃上清。加入 Earle 培养液 0.5ml 重新悬浮细胞，用于精子密度或功能的评估。 2)、非连续密度梯度法：取一个无菌的 15ml 锥底离心管，加入 3ml 80%的 Percoll。轻轻加入 3ml 40%的 Percoll 于 80%的 Percoll 液面上，小心操作，不 要打乱两种液体的界面。轻轻加入 1-2ml 精液于梯度溶液上，500g 离心 20min，弃上清。将管底的精子团重新悬浮于 5-10ml 的 Earle 培养液中，500g 离心 5min，弃上清。加入 1ml Earle 培养液，重新悬浮。 3、将含有精子细胞的离心管置于 37℃含 5%CO2、95%空气的细胞培养箱中孵 育 1h。如无上述培养箱，可将离心管密封加盖，置于 37℃的普通培养箱内孵育。 在孵育过程中，大多数活动的精子从精浆中游离到覆盖上面的培养液内。 4、500g 离心精子悬液 5min，使精子细胞密度接近于 10×10 /ml，将精子重悬

于 0.5-1ml 精子细胞 BWW 培养基中，并在 37℃含 5%CO2、95%空气的细胞培 养箱内孵育 18-24h。如无上述培养箱，可将离心管密封加盖，置于 37℃的普通 培养箱内孵育。在孵育过程中，将试管 20°倾斜

注意事项： 1、注意无菌操作，尽量避免污染。 

        2、如无 Earle 培养液和增补的 Earle 培养液，可用精子细胞 BWW 培养基代替。 

        3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 

有效期：6 个月有效。